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薄層層析板詳細操作過程

更新時間:2013-12-25      點擊次數:1384

顯色
噴顯色劑顯色zui重要是有好的霧化器。

點樣
盡量用小的點樣管。如果有足夠的耐性,隻用1微升的點樣管。這樣,點的斑點較小,展開的色譜圖分離度好,顏色分明。樣品溶液的含水量越小越好,樣品溶液含水量大,點樣斑點擴散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。點好樣的薄層層析板用電吹風的熱風吹幹或放入幹燥器裏晾幹。

展開劑配製
選擇合適的量器把各組成溶劑移入分液漏鬥,強烈振搖使混合液充分混勻,放置,如果分層,取用體(ti) 積大的一層作為(wei) 展開劑。不應該把各組成溶液倒入展開缸,振搖展開缸來配製展開劑。混合不均勻和沒有分液的展開劑,會(hui) 造成層析的*失敗。各組成溶劑的比例準確度對不同的分析任務有不同的要求,盡量達到實驗室儀(yi) 器的zui高度,比如:取1ml的溶劑,應使用1ml的單標移液管,移液管應符合計量認證要求,盡管多數時候這不是必須的。

展開係統的飽和
一般使用的是雙槽的展開缸,一槽用來放展開劑,另一槽可加入氨水或硫酸。把待展開的板放入兩(liang) 槽間的平台,斜架著,蓋上展開缸的蓋子。讓展開劑的蒸氣充滿展開缸,並使薄層板吸附蒸氣達到飽和,防止邊沿效應,飽和時間在半個(ge) 小時左右。展開時難免要打開蓋子把薄層層析板放入展開劑中,不過對薄層板與(yu) 蒸氣的吸附平衡影響不大,當然動作應該盡量輕、快。

溫濕度的控製
溫濕度對薄層影響都很大。不凍結的前提下,通常溫度越低分離越好,較難的分離需在低溫下分離,例如人參皂苷。濕度的影響,估計主要是影響薄層板的吸附能力,導致選擇性(容量因子)的變化,濕度應根據實際情況確定。溫度控製使用空調器或冰櫃,濕度控製是通過在另一展開槽放置相應濃度的硫酸。
 

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