蛋白相較於(yu) 核酸,因其承擔生物學功能,有“活性”特征,蛋白樣品的處理要求操作者有更好的經驗和技巧。拿蛋白濃縮這一常規操作來講,根據樣品規模(體(ti) 積)、通量(樣品個(ge) 數)、混合物的複雜程度及相關(guan) 設備配套要求,就分為(wei) 鹽析、透析、凍幹、分子篩色譜等等不同選擇。而超濾,不論從(cong) 操作的簡便性還是處理效率來說,都算優(you) 勢突出,成為(wei) 蛋白濃縮/除鹽/緩衝(chong) 液置換等蛋白綜合處理的。掌握好超濾技巧,我們(men) 就能更好地保全蛋白活性和得率。針對於(yu) 蛋白在超濾濃縮過程中容易發生沉澱這個(ge) 現象,就超濾管的使用提出一些建議,供您靈活選用。
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉澱。我們(men) 建議蛋白濃縮後的zui終濃度不超過20mg/ml。對於(yu) 對濃縮速度敏感而容易沉澱的蛋白,我們(men) 建議的改進方法是:
1)離心力降為(wei) 推薦離心力的30%-50%;
2)改選擇截留分子量更大的過濾裝置(如原本選用10k,此時可以選擇30k);
3)在濃縮過程中取出超濾管,用槍頭反複吹吸幾次。
傳(chuan) 真:(微信)13061776706
郵箱:13061776706@163.com
地址:上海市寶山區淞濱路803弄