如何結合需求購買離心機？PBMC 單核細胞的密度梯度離心分離篇

      測定細胞免疫功能首先要從(cong) 人或動物外周血或組織中獲取有活性的細胞，如淋巴細胞、巨噬細胞、粒細胞等。血液主要由血清和血細胞組成，主要包括紅細胞，白細胞和血小板等。白細胞還可以細分為(wei) 淋巴細胞和單核細胞等。由於(yu) 這些細胞具有簡單的細胞核，統稱為(wei) 外周血單核細胞 (PBMC)。 取得有活性的細胞應根據不同的實驗、檢驗和治療的目的，采用不同方法，需要考慮的因素有：1細胞純度，2細胞獲得量，3細胞活力，4使用方法的簡易程度和本室條件等。PBMC 單核細胞可通過 Ficoll 密度梯度離心的方法，從(cong) 血液中進行分離。

       在 Ficoll 密度梯度離心的過程中，需要注意的有：
● 使 Ficoll-Paque Plus 和 PBS 升至室溫，並用 70% 乙醇消毒血袋外部，良好的溫度 (18-20℃) 控製有利於(yu) 穩定 Ficoll 的密度，可以實現更好的分離效果
● 血液與(yu) PBS 的比例保持 1：1，擰緊蓋後顛倒混合幾次
● 可以使用 ep 25 mL 錐底管，並輕輕的將血液/PBS 混合物鋪置 Ficoll 上
● 離心參數：400 x g, 20 ℃，加減檔 0/0，防止離心結束後的刹車震動，防止產(chan) 生重懸，更利於(yu) 良好分層。隨後開啟“Atset”功能，可以在達到轉速後開始計時，離心 30 分鍾
● 使用 PBS 洗滌細胞，離心除去殘餘(yu) 的 Ficoll 液，400 x g, 20 ℃，10 分鍾，重複幾次
       綜上所述，一台搭配了適當的水平轉子的 5804R 多用途離心機會(hui) 是您入門級的選擇，同時又不失其專(zhuan) 業(ye) 性。
 

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